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介紹一下人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒的操作方法

發(fā)布時間:2025-02-06   點(diǎn)擊次數(shù):68次

介紹一下人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒的操作方法

本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被有人載脂蛋白 A1(apo-A1)捕獲抗體的微孔中,依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記的檢測抗體,HRP 酶結(jié)合物,中間經(jīng)過溫育和洗滌,用底物 TMB 顯色,TMB 在過氧化物酶(HRP)的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人載脂蛋白 A1(apo-A1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。 

靈敏度:15.1ng/mL 

 

apo-A1 簡介

載脂蛋白A1是一種蛋白質(zhì),由APOA1基因編碼。作為高密度脂蛋白顆粒的主要成分,它在脂質(zhì)代謝中具有特殊作用。APOA1基因位于第11條染色體上,具體位置為11q23-q24,該基因包含4個外顯子。APOA1編碼一個28.1kDa的蛋白質(zhì),由243個氨基酸組成;通過質(zhì)譜數(shù)據(jù)觀察到21個肽。載脂蛋白A1是血漿中高密度脂蛋白顆粒的主要蛋白成分。從腸道細(xì)胞分泌的乳糜微粒也含有載脂蛋白A1,但它在血液中迅速轉(zhuǎn)移到高密度脂蛋白。該蛋白作為高密度脂蛋白顆粒的一個組成部分,通過接受細(xì)胞內(nèi)的脂肪(包括動脈壁內(nèi)的巨噬細(xì)胞,這些巨噬細(xì)胞已被氧化的低密度脂蛋白顆粒攝入的脂肪超載),使脂肪分子外流到其他地方,包括回到低密度脂蛋白顆?;虻礁闻K排泄出來。

介紹一下人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測試劑盒的操作方法

結(jié)果判斷: 

1. 計算標(biāo)準(zhǔn)品和樣本復(fù)孔的平均 OD 值并減去空白孔的 OD 值作為校正值。以濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在雙對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出四參數(shù)邏輯函數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(作圖時去掉空白組的值)。 

2. 若樣品 OD 值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測并在計算樣本濃度時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 

典型數(shù)據(jù)和參考曲線:以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。 

注意:本圖僅供參考,應(yīng)以同次試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計算標(biāo)本含量。

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試劑盒性能:

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