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解析羊elisa檢測試劑盒的詳細操作流程

發(fā)布時間:2019-09-18   點擊次數(shù):2272次
   羊elisa檢測試劑盒測定在臨床檢驗中的應用由于各種抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體,利用此抗體作為試劑就可檢測標本中相應的抗原,因此免疫測定的應用范圍極廣,在臨床檢驗中可用于測定:
  1、體液中的各種蛋白質,包括含量極少的蛋白質如甲胎蛋白等。
  2、激素,包括小分子量的甾體激素等。
  3、抗生素和藥物。
  4、病原體抗原,HBsAg、HBeAg等。
  5、另外,也可利用純化的抗原檢測標本中的抗體,例如抗-HBs等。
 
  羊elisa檢測試劑盒的優(yōu)勢特點:
  1、*試劑:性、靈敏性、特異性。
  2、規(guī)范包被操作:吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高。
  3、先進的優(yōu)化方案:回收利用率高、可靠性強。
  4、適用范圍:適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
  5、可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等。
  6、節(jié)省實驗經(jīng)費。
 
  羊elisa檢測試劑盒的操作流程如下:
  1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
  2、酶標板置4℃,包被過夜。
  3、洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
  4、陰性對照孔每孔加入PBS50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
  5、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
  6、洗板,同(4)。
  7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。
  8、酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
  9、洗板,同(4)。
  10、每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
  11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應。
  12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
  13、數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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