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人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒定量檢測(cè)性能

發(fā)布時(shí)間:2018-06-01   點(diǎn)擊次數(shù):1823次

人促甲狀腺素TSH酶聯(lián)免疫分析(ELISA)

試劑盒使用說(shuō)明書

Cat.No. RJ-12071

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中促甲狀腺素(TSH)的含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本人促甲狀腺素(TSH)水平。用純化的人促甲狀腺素(TSH)捕獲抗體包被微孔板,制成固相體,往包被的微孔中依次加入人促甲狀腺素(TSH),再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人促甲狀腺素(TSH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品人促甲狀腺素(TSH)含量

 

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說(shuō)明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:12、6、3、1.5、0.75、0 mU/L.

注意事項(xiàng):

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請(qǐng)避光保存。
  • 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

 

 

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。                  

 

                                              

 

(此圖僅供參考)

 

 

 

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于10%和15% 。

 

檢測(cè)范圍:                                              

0.375 mU/L - 12 mU/L

 

靈敏度:                                              

zui低檢測(cè)濃度小于0.1 mU/L

 

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存: 2-8。

2.有效期: 6個(gè)月

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